词典参考样式结果:
-
最常用的Cas9直系同源物SpCas9利用了在5′末端包含20个核苷酸(nt)与靶DNA位点“前间隔序列”( protospacer)区域互补的crRNA。crRNA和tracrRNA通常结合成大约100-nt的单导向RNA (gRNA),指导SpCas9的DNA切割活性。 具有17或18个核苷酸的截短的gRNA可以减少脱靶效应而不损害切割效率。可尝试使用截断的protospacer来增加实验的特异性。你也可以通过使用成对的Cas9切口酶引入插入缺失来减少脱靶效应。
-
CRISPR靶向特异性是由两部分决定的,一部分是RNA嵌合体和靶DNA之间的碱基配对,另一部分是Cas9蛋白和一个短DNA序列,这个短的DNA序列通常在靶DNA的3‘‘末端作用,被称为protospacer adjacent motif(PAM)。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
|
|